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Rotenone(高纯帕金森造模剂)
Rotenone(高纯帕金森造模剂)
Rotenone(高纯帕金森造模剂)
商品货号:MB5842
CAS 号:83-79-4
英文名字:鱼藤酮;罗藤酮
质量标准:>95%,用于Parkinsonism造模
分子式:C23H22O6
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    Rotenone(高纯帕金森造模剂),鱼藤酮, 罗藤酮
    本品为经典的线粒体电子传递抑制剂,常用于动物帕金森模型制备
    分子式: C23H22O6 分子量:394.42
    物理性状及指标
    外观:……………………微黄色结晶粉末
    溶解性:…………………Soluble to 100 mM in DMSO and to 5 mM in ethanol, insoluble in water
    含量:……………………>95%
    重金属:…………………≤10ppm
    砷:………………………≤2ppm
    用途及描述:科研试剂,线粒体电子传递的抑制剂
    储存条件:-20摄氏度对光和空气敏感,充氩避光保存
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    使用方法(来自公开文献仅供参考)
    一:鱼藤酮制备帕金森大鼠模型
    1 动物分组及给药
    雄性Wistar 大鼠36只,体重200-250克,随机分为葵花油8周对照组、鱼藤酮4周组,鱼藤酮8周组。所有大鼠在预定观察期内如出现预定终止观察标准症状,立即终止观察;未出现者,则在预定观察期末终止观察。终止观察标准为四肢不能站立行走,翻身困难,丧失主动进食能力。
    注射方法:背部皮下注射法
    剂量:葵花油 1ml/kg体重;
    鱼藤酮葵花油乳液(浓度2mg/kg)1ml/kg体重

     

    二 常见 帕金森动物模型制备药物
    帕金森病是一种神经退行性疾病,其特征为黑质纹状体通路的多巴胺能神经元的变性。PD典型的病理学改变是包括α-synuclein和泛肽在内的胞浆内含物的出现(Lewy体)。PD的发病机理并不完全清楚,但是环境和遗传因素在该病的发生过程中的两个重要的因素。为了研究PD的发病机制和探索缓解该病症状的更好的疗法,故制造出与此病相似的动物模型非常重要。在这篇综述中,我们总结了各种体内和体外的PD模型并评价他们的价值。

     

    MPTP(MB3783)
    MPTP是1982年在一组药物成瘾所致的亚急性重症帕金森患者体内发现的。这种症状是由于这些人自己服用一些含有与人工合成的吗啡结构相似的药物所致,而这种药物被加工过程中的一些副产物MPTP所污染,这种副产物有高亲脂性并且能够通过血脑屏障。胶质细胞内的单胺氧化酶能将MPTP转化成1-甲基-4-苯基吡啶(MPP+),后者可以被DA转运体所摄取并在DA神经元内堆积。缺乏这种转运体的小鼠能避免MPTP的毒性损害。吸收的MPP+在线粒体内富集,它们能够抑制线粒体电子转运链中复合物Ⅰ从而使ATP的生成减少并且产生活性氧自由基诱导DA神经元的凋亡。有趣的是,MPTP甚至能使具有中央神经系统的一些最低级的无脊椎动物如扁形虫、三涡虫神经元死亡。这提示MPTP对无脊椎动物和灵长类动物都具有神经毒性。
    在灵长类动物,如人、猴、狒狒中,MPTP能引起不可逆的严重的帕金森症状,这种症状与散发的PD不能区别。这其中包括黑质DA神经元的变性,微包涵体的出现(例如嗜依红性包涵体和a-synuclein的聚合体(并不是典型的Lewy体)),在电镜下观察这些微包涵体由一个高密度的粒状核心和围绕其周围的放射状细丝晕组成。对灵长类动物予以MPTP处理后其显示出对左旋多巴(L-3,4二羟基多巴)及其它DA受体激动剂较好的应答。然而,采用MPTP毒素制作PD模型的主要缺点是PD是一种慢性发展的疾病,而MPTP所致的是急性或亚急性的发病过程。在灵长类动物中采用不同的剂量水平慢性给与MPTP已经显示能够产生缓慢发展的帕金森病症状,其在纹状体多巴胺纤维的损失不均匀并且显示出在黑质部位DA神经元的选择性的损耗。
    啮齿类动物,如大鼠和小鼠,其对MTPT的神经毒性作用不如灵长类的敏感,它们需要更高浓度的MPTP才能诱导DA的损耗而且很少产生永久的帕金森病的行为学症状。在啮齿类动物,帕金森样症状的出现需要采用D2受体拮抗剂完全阻断DA的应答,相对较少的DA损耗是不足以产生这些症状的。因而,采用MTPT处理的猴子可能是PD更加理想的动物模型。然而,C57BL/6系的小鼠是对MPTP最敏感的啮齿类动物。因而MTPT处理过的C57BL/6系小鼠可能是一个同样很有效的模型,而这种模型对于PD最主要的区别在于缺少Lewy体的结构。
    另外还还有用MPTP处理过的其他脊椎动物和无脊椎动物模型。例如,一种两栖类的脊椎动物Rana pipiens蛙,在用MPP+或MPTP处理之后其能显示出DA含量的减少和运动失调。有一种医用的无脊椎节段蠕虫Hirudo medicinalis水蛭,在使用MPTP处理之后其同样能显示出DA含量的减少和运动失调,而另外一种美国水蛭Macrobdella decora却对MPTP不敏感。近来,人们对一种无脊椎扁形虫——涡虫(Dugesia japonica)予以MPTP处理,从而制作了一种全新的模型,并且发现MPTP能够明显的诱导DA神经元的自我分解(类似于细胞凋亡)。此外MPTP在涡虫中诱导的自我分解可以被抗帕金森的新药如pramipexole和talipexole,完全阻断,这两种药物是非麦角碱类的D2受体亚族激动剂。因而MPTP诱导的凋亡样神经元死亡同样可能发生在无脊椎扁形虫中。


    6-OHDA(Mb5924)
    6-OHDA是用来制作帕金森病动物模型的第一种药物,两种啮齿类动物模型已经讲述过了。最常用的方法是单侧注射6-OHDA至黑质或者中央前脑束,这可以使DA神经元细胞在较短的时程内快速的死亡,这与急性MPTP模型相似。另外一种6-OHDA模型直接注射这种毒素到纹状体内而导致黑质神经元的退行性变。这种方法可以在四周时间内缓慢的部分损伤这些神经元,因而已经被用来模拟PD的慢性病程。
    在向黑质注射6-OHDA之后,这些药物选择性的累积在DA神经元并对其产生毒性作用。这一过程可能是通过产生自由基而完成的。6-OHDA对大鼠、小鼠、猫以及灵长类动物是一种高效的毒物,并且被广泛用来制作单侧损伤模型。在大鼠中广泛的DA损耗可以通过对给与安非他明和脱水吗啡引起的旋转活动来进行评估。6-OHDA在黑质中引起的损伤并不形成Lewy体,并且可以引起其他神经元非特异性的损伤。尽管如此,这种模型主要的优点是可以计量运动减少(旋转),因而这一模型被证实在药理学研究中用来观察药物对多巴胺及其受体是否有效是非常有用的。


    鱼藤酮,罗滕酮(Rotenone)(Mb5842)
    罗滕酮是一种天然的杀虫剂,其起源于某些特殊植物的根部,并且是一种线粒体复合物Ⅰ的高亲和力的特异性抑制剂。Betarbet等人证实大鼠通过颈静脉丛插管长期的系统的给与罗滕酮可以产生许多PD的特征,包括黑质纹状体多巴胺能神经元的变性和DA神经元内Lewy体的形成。这些包涵体可以被泛肽和a-synuclein抗体所染色,电镜下观察示高密度的核心被纤维状物质环绕,这与Lewy体的结构非常相似。实验大鼠出现运动徐缓,姿态不稳,步态不稳以及一些振颤的迹象,这些症状在给与DA受体激动剂脱水吗啡后得以改善。然而,PD样病理学改变仅见于用6OHDA处理过的大约半数Lewis大鼠,而这些症状在其他系的大鼠中则观察不到。
    近来Betarbet等又证实这些PD特征可以同样通过采用皮下微量渗透泵长期系统给与罗滕酮来产生,并提示这种缓慢的罗滕酮给药法是一个较好的改进的简单给药法。
    蛋白酶体抑制剂
    蛋白酶体抑制剂今年来常用于制备PD动物模型,其主要通过抑制USP的功能,在细胞上发生特异性影响,使蛋白质代谢发生异常,导致蛋白质的异常聚焦,尤其是a-syn的聚集而制作PD大鼠模型。
    最常见的药物有 天然蛋白酶抑制因子,人工合成的蛋白酶抑制剂,蛋白酶体抑制剂乳胞素。比如:Lactacystin/乳胞素(Mb5926)PSI(蛋白酶体抑制剂)(Mb2634)epoxomycin,Epox(Mb3678)MG132(Mb5137)

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